Descripción
CALDO MUELLER HINTON
El caldo Mueller Hinton es un medio bacteriológico estable sin suero que permitía el crecimiento de dos bacterias muy fastidiosas, el meningococo y el gonococo. Más tarde se mejoró añadiendo cationes para aumentar la recuperación de Pseudomonas y para propagar la gran mayoría de bacterias patógenas que se encuentran en la práctica clínica. Al principio de la era de los antibióticos, la versatilidad del caldo Mueller Hinton y su agar era una combinación perfecta, que permitía un medio estandarizado y consistente para la dilución en caldo o la prueba de difusión en disco de la potencia antibiótica, definida con mayor frecuencia en términos de concentración inhibitoria mínima (CIM). En las últimas décadas, el MHB ha sido aprobado por el Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), la organización mundial sin ánimo de lucro que garantiza la calidad de las pruebas sanitarias, como el medio adecuado para la determinación rutinaria de la sensibilidad antibiótica bacteriana, con normas de corte actualizadas para designar las cepas resistentes y susceptibles.
COMPOSICIÓN
PRINCIPIO
La carne de vacuno, en forma de infusión, y el hidrolizado ácido de caseína aportan compuestos nitrogenados, carbono, azufre y otros nutrientes esenciales. El almidón actúa como coloide protector contra las sustancias tóxicas presentes en el medio. Estos ingredientes se seleccionan por su bajo contenido en timina y timidina, determinado por los valores MIC para Enterococcus faecalis con sulfametoxazol-trimetoprima (SXT). El CLSI recomienda los siguientes niveles de cationes Ca++, 20-25mg/litro; Mg++, 10- 12,5mg/litro para que estén presentes en el caldo mientras se realiza el método de dilución en caldo. El nivel de cationes suele ser inadecuado en el medio; la concentración de cationes ya presente en el caldo debe la cantidad de Ca++ o Mg++; si es necesario añadirla. El CLSI recomienda una reserva de cationes para añadir cationes suplementarios: 8,36 g de MgCl2.6H2O en 100 ml contiene 10 mg de Mg++/ml y 3,68 g de CaCl2.2Hin2O100ml contiene 10 mg de Ca++/ml. Como alternativa, está disponible el caldo Mueller Hinton nº 2 Control Cations, en el que los cationes se ajustan según las directrices estándar.
INSTRUCCIONES DE USO
- Disolver 21,0 gramos en 1000 ml de agua purificada/destilada.
- Calentar hasta ebullición para disolver completamente el medio.
- Mezclar bien y dispensar en tubos o matraces según se desee.
- Esterilizar en autoclave a 15 psi de presión (121°C) durante 15 minutos.
Nota: Se sugiere hervir el medio antes de esterilizar en autoclave para evitar la sedimentación de almidón en el fondo
INTERPRETACIÓN
Características culturales observadas tras una incubación.
EMBALAJE
En envases de 100 y 500 gramos
ALMACENAMIENTO
Polvo deshidratado, de naturaleza higroscópica, almacenar en un lugar seco, en recipientes herméticamente cerrados entre 25-30°C y proteger de la luz solar directa. En condiciones óptimas, el medio tiene una vida útil de 4 años. Cuando se abra el envase por primera vez, anote la hora y la fecha en el espacio previsto para ello en la etiqueta del envase. Una vez extraída la cantidad deseada de medio, vuelva a colocar el tapón herméticamente para protegerlo de la hidratación.
Deterioro del producto: No utilizar si presentan indicios de contaminación microbiana, decoloración, desecación o cualquier otro signo de deterioro.
DISPOSICIÓN
Después de su uso, las placas preparadas, los recipientes para muestras y otros materiales contaminados deben esterilizarse antes de desecharlos.
REFERENCIAS
1. CLSI): Clinical and Laboratory Standards Institute. 25th Informational Supplement. Clinical and Laboratory Standards Institute; Wayne, PA: 2015. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; p. M100-S25.
2. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition.
3. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
4. Mueller J.H., Hinton J. A protein-free medium for primary isolation of the Gonococcus and Meningococcus. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1941;48:330– 333.
5. Victor Nizet; «The Accidental Orthodoxy of Drs. Mueller and Hintion»; EBiomedicine 22 (2017) 26-27PMID:28689739.
