Descripción
BASE AGAR CARBÓN
El género Bordetella contiene cuatro especies: Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica y Bordetella avium. Los estudios genéticos han demostrado que estos organismos están muy estrechamente relacionados entre sí. Los seres humanos son el único huésped de B.pertussis y B.parapertussis, mientras que B.bronchoseptica se encuentra en una amplia variedad de animales y ocasionalmente en seres humanos. B.avium se encuentra en las aves. Las especies de Bordetella son aeróbicas obligadas y metabólicamente poco activas. Son inmóviles excepto B. bronchoseptica. B.pertussis es la principal causa de tos ferina o tos ferina. B. parapertussis se asocia con una forma más leve de la enfermedad. El aislamiento primario de B. pertussis en particular requiere la adición de carbón, 15-20% de sangre para neutralizar los efectos inhibidores del crecimiento. El aislamiento de este organismo requiere un medio de enriquecimiento. El agar carbón se prepara según el método de Mishulow, Sharpe y Cohen. Este medio se puede utilizar como reemplazo del agar Bordet-Gengou para el aislamiento de B. pertussis y para la producción de vacunas contra B. pertussis . El agar carbón suplementado con sangre de caballo también se puede utilizar para el cultivo y aislamiento de Haemophilus influenzae.
La dificultad en el aislamiento de Bordetella pertussis de las secreciones nasofaríngeas es la represión de la flora no deseada durante el largo período de incubación en medios nutritivos. Se puede añadir penicilina al medio como agente antimicrobiano para restringir los otros contaminantes. Sin embargo, las floras resistentes a la penicilina todavía causan contaminación, como observó Lacey. Se encontró que la meticilina es superior a la penicilina en la supresión de la flora nasofaríngea no deseada, según lo observado por Broome et al. Sutcliffe y Abbott descubrieron que la cefalexina seguía siendo mejor que la meticilina.
Examine las placas después de 40 horas de incubación y dos veces al día a partir de entonces. En las placas se observan pequeñas colonias de especies de Bordetella de color blanco grisáceo brillante, con esquinas redondeadas . Confirme los hallazgos con DFA, es decir, prueba de anticuerpos fluorescentes directos. Para hacer un diagnóstico más temprano, realice una prueba de anticuerpos fluorescentes directos en la secreción.
COMPOSICIÓN
PRINCIPIO
Los ingredientes como la infusión de carne de vacuno, peptona, extracto de levadura proporcionan nutrientes esenciales para los organismos. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico. El almidón soluble y el carbón neutralizan sustancias tóxicas para las especies de Bordetella como los ácidos grasos. El carbón tiene la tendencia a asentarse en el fondo del matraz. Por lo tanto, antes de dispensar, agite suavemente los matraces para obtener una suspensión uniforme de carbón.
INSTRUCCIONES DE USO
- Disolver 31,25 gramos en 450 ml de agua purificada/destilada.
- Calentar a ebullición para disolver el medio con agitación frecuente.
- Esterilice en autoclave a una presión de 15 psi (121 °C) durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C.
- Añadir asépticamente el 10% estéril de sangre desfibrinada y el contenido rehidratado de 1 vial de Bordetella Selective Supplement.
- Mezclar bien y verter en placas Petri estériles.
- El agar carbón se puede convertir en agar chocolate para el aislamiento de especies de Haemophilus .
INTERPRETACIÓN
Características culturales observadas después de la incubación con sangre desfibrinada estéril añadida y suplemento selectivo de Bordetella.
EMBALAJE:
En envases de botellas de 500 g.
ALMACENAMIENTO
Polvo deshidratado, de naturaleza higroscópica, almacenar en lugar seco, en recipientes herméticamente cerrados entre 25-30°C y proteger de la luz solar directa. En condiciones óptimas, el medio tiene una vida útil de 4 años. Cuando se abre el envase por primera vez, anote la hora y la fecha en el espacio de la etiqueta provisto en el envase. Una vez que se haya extraído la cantidad deseada de medio, vuelva a colocar la tapa herméticamente para protegerla de la hidratación.
Deterioro del producto: no lo use si muestra evidencia de contaminación microbiana, decoloración, secado o cualquier otro signo de deterioro.
DESECHO
Después del uso, las placas preparadas, los recipientes de muestra/espécimen y otros materiales contaminados deben esterilizarse antes de desecharse.
REFERENCIAS
1. Broome CV, Fraser DW y English JW, 1979, Internat. Síntoma sobre la tos ferina DHEW J., Washington DC, pp 19-29. 2. Lacey BW, 1954, J. Hyg., 59:273.
3. Linneman y Pery, 1977, Am. J. Dis. Niño., 131:560.
4. MacFaddin JF, 1985, Medios para aislamiento-cultivo-identificación-mantenimiento de bacterias médicas, vol. Yo, Williams y Wilkins, Baltimore. 5. Mishulow, Sharpe y Cohen, 1953, Am. J. Salud Pública, 43:1466.
6. Murray PR, Baron JH, Pfaller MA, Jorgensen JH y YolkenR. H., (Ed.), 2003, Manual of Clinical Microbiology, 8th Ed., American Society for Microbiología, Washington, DC
7. Regan y Lowe F., 1977, J. Clin. Microbiol., 6:303.
8. Sutcliffe EM y Abbott JD, 1979, BMJ II: 732-733.
