Agar cromogénico uti

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El agar cromogénico uti es un medio cromogénico para la identificación y confirmación presuntiva de microorganismos causantes de  infecciones del tracto urinario, los cuales son generalmente de la especie: E. coli.

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Descripción

Agar Cromogénico Uti

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR CROMOGINICO UTI

Medio de cultivo utilizado para la detección presuntiva y diferenciación de microorganismos que causan infecciones del tracto urinario.

 

COMPONENTES DEL AGAR CROMOGINICO UTI

  • Mezcla de Cromogénica.
  • Peptona, especial.
  • Agar liofilizado.

 

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR CROMOGINICO UTI

  • Unidad, paquete de 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

  • Mechero de Bunsen.
  • Asas bacteriológicas.
  • Elementos de protección.
  • Incubadora a 37°C.
  • Guantes. 
  • Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

 

  • Principio del método:

En una sola placa gracias a los sustratos cromogénicos se logra la detección directa de distintas especies que causan infecciones del tracto urinario- 

La mezcla de peptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El medio se encuentra adicionado con una mezcla cromogénica, X-Glucosido que tiene como blanco la actividad enzimática de β-glucosidasa especial de Enterococcus generando colonias de color azul y Rosa-Galactosido como blanco de la enzima β-galactosidasa producida por E.coli formando colonias rosadas, la ruptura de los dos cromogénicos por las enzimas producen colonias azul oscuro-purpura para los pertenecientes géneros Klebsiella, Enterobacter y Serratia. El medio contiene fenilalanina y triptófano, que cumplen la función como indicadores de la actividad del triptófano deaminasa que indica la presencia de Proteus spp, Morganella spp y Providencia spp, generando colonias de color marrón claro. El medio proporciona los nutrientes necesarios, Nitrógeno y compuestos de carbono por medio del digerido péptico de tejido animal, caseína hidrolizada enzimática y extracto de carne. 

 

  • Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio diferencial con identificación presuntiva de los principales patógenos que causan infecciones del tracto urinario. 

Cabe señalar que, al igual que con todos los medios cromogénicos, los microorganismos con patrones de enzimas atípicas pueden dar reacciones anómalas. Por ejemplo, el 45% de Enterobacter cloacae no contiene ß-glucosidasa, lo que da como resultado colonias rosadas no distinguibles de E. coli. Para la confirmación, se debe realizar la prueba de Indol.

  • Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

  • Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

.Espécimen o muestra:

Muestras de orina, para uso clínico, industrial o de investigación. 

 

Procedimiento:

  1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
  2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
  3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
  4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
  5. Incubar las placas entre 35 a 37°C en posición invertida, por 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio
  6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
  7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:


CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR CROMOGINICO UTI

  • Prueba Macroscópica: 
  • Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color beige.
  • pH final: 7.2 ± 0.2 (25°C).
  • Volumen: 19 mL ±.
  • Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.
  • Prueba de efectividad: La efectividad del medio se evalúa el crecimiento, inhibición y producción de pigmentos, realizado con cepas ATCC, en condiciones de aerobiosis, entre 24 y 120 horas a una temperatura entre 35 – 37°C. A continuación, se muestran las cepas de control.
Microorganismos Cepa Crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio. Crecimiento Colonia naranja
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Satisfactorio. Crecimiento Colonia azul turquesa
Klebsiella pneumoniae ATCC  700603- 1705-2146 Satisfactorio. Crecimiento Colonia Morada

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR CROMOGINICO UTI

  • Para uso de diagnóstico in vitro.
  • Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
  • Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas. 
  • El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

  • APS One.
  • Cabina de flujo laminar.
  • Master Clave.
  • Autoclave.
  • Incubadora.

 

BIBLIOGRAFÍA:

  • Pezzlo M., 1998, Clin. Microbiol. Rev., 1:268-280.
  • Wilkie M. E., Almond M. K., Marsh F. P., 1992, British Medical Journal 305:1137-1141.
  • Friedman M. P. et al, 1991, J. Clin. Microbiol., 29:2385-2389.
  • Murray P., Traynor P. Hopson D., 1992, J. Clin. Microbiol., 30:1600-1601.
  • Collee J. G., Fraser A. G., Marmion B. P., Simmons A., (Eds.), Mackie and McCartney, Practical Medical Microbiology, 1996, 14th Edition, Churchill Livingstone.
  • Samra Z, Heifetz M, Talmor J, Bain E and Bahar J. Evaluation of use of a new chromogenic agar in detection of urinary tract pathogens. J Clin Microbiol. 1998;36(4]: 990-4.
  • Normatividad de reactivos de diagnóstico in vitro, decreto 3770 de 2004, decreto 4124 de 2008, Ministerio de Salud y Protección Social. • NCCLS. Quality control for commercially prepared microbiological culture media; approved standard- Third edition. Vol 24 number 19 June 2004. •The Himedia Manual, 2009 a manual of microbiology laboratory practice.

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