Descripción
Agar Mac conkey
APLICACIÓN Y USO DEL AGAR MAC CONKEY
Medio selectivo, diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores de lactosa.
COMPONENTES DEL AGAR MAC CONKEY
- Gelatina de digerido pancreático.
- Lactosa monohidrato.
- Sales biliares.
- Cloruro de sodio.
- Rojo neutro.
- Cristal violeta.
- Agar liofilizado.
- Peptona de proteosa
CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR MAC CONKEY
- Unidad, paquete por 10 placas.
MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:
- Mechero de Bunsen.
- Asas bacteriológicas.
- Elementos de protección.
- Incubadora a 37°C.
- Guantes.
- Cepas ATCC.
METODOLOGÍA:
- Principio del método:
Es un medio selectivo y diferencial para el aislamiento de bacterias Gram negativas entéricas y se recomienda para la prueba de E. coli.
Este medio ha sido especialmente diseñado para detectar la fermentación de la lactosa mediante un cambio de color, a rojo neutro.
- Colonias lactosa (+): Rosa a rojas, a veces rodeadas por un halo de sales biliares precipitadas.
- Colonias lactosa (-): Incoloras o ligeramente beige.
Las sales biliares y el cristal violeta hacen el medio selectivo para las bacterias Gram positivas.
Este agar cuenta con una mejor inhibición del agrupamiento dinámico de la especie Proteus, logra una diferenciación más definitiva de los organismos fermentadores y no fermentadores de lactosa y alcanza un crecimiento superior de las bacterias entéricas.
El digerido pancreático de gelatina y peptonas proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esencial para el crecimiento. La lactosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. El cloruro sódico suministra los electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico. Las sales biliares y el Cristal violeta son los agentes selectivos e inhibe organismos Gram positivos. El rojo neutro es el indicador de pH. Cuando se fermenta la lactosa, el pH del medio disminuye, cambiando el color de rojo neutro a rosa. El agar bacteriológico es el agente solidificante, a partir de las heces, aguas residuales de orina y alimentos.
- Criterios de desempeño y limitaciones del método:
Aislamiento selectivo y diferencial de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram negativos a partir de muestras clínicas.
- Preparación de reactivos:
El medio se encuentra listo para ser usado.
- Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:
El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.
Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.
- Espécimen o muestra:
Todo tipo de muestras clínicas, agua, farmacéutica, veterinaria, cosméticas, alimentos y bebidas alcohólicas, para uso clínico, industrial o investigativo.
Procedimiento:
- Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
- Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
- Tener asa estéril para la toma de muestra.
- Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
- Incubar las placas a 35 – 37°C en posición invertida, entre 18-24-48-72 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
- Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
- Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:
CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR MAC CONKEY
- Prueba Macroscópica:
- Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color rosa.
- pH final: 7.1 ± 0.2 (25°C).
- Volumen: 19 mL ±.
- Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.
- Prueba de efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas ATCC de:
Microorganismos | Cepa | Crecimiento |
Escherichia coli | ATCC 700603- 1705- 2146 | Crecimiento colonia Rosa (fermentadora de lactosa) |
Klebsiella pneumoniae | ATCC 12453 | Crecimiento colonia Rosa (fermentadora de lactosa) |
Salmonella enteritiditis | ATCC 13076 | Crecimiento colonia amarilla (No fermentadora de lactosa) |
Enterococcus faecalis | ATCC 29212 | Inhibición total |
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR MAC CONKEY
- Para uso de diagnóstico in vitro.
- Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
- Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
- El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.
TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:
- APS One.
- Cabina de flujo laminar.
- Master Clave.
- Autoclave.
- Cepario.
- Incubadora.
BIBLIOGRAFÍA:
- Norton C. F., 1986, Microbiology, 2nd Edition, Addison-Wesley Publishing Company.
- 2. Hunter D. and Kearns M., 1977, Brit. Vet. J., 133:486.
- 3. Snavely and Brahier, 1960, Am. J. Clin. Pathol., 33:511.
- 4. Becton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and
- Ingredients Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003.