Descripción
AGAR MUELLER HINTON Nº 2
El objetivo de la prueba de susceptibilidad es predecir a través de una evaluación in vitro la probabilidad de tratar con éxito la infección de un paciente con un agente antimicrobiano en particular. La fórmula de Mueller Hinton se desarrolló originalmente como un medio de agar simple y transparente para el cultivo de especies patógenas de Neisseria . Posteriormente se desarrollaron otros medios que reemplazaron el uso de Mueller Hinton Agar para el cultivo de especies patógenas de Neisseria , pero se utilizó ampliamente en la determinación de la resistencia a las sulfonamidas de los gonococos y otros organismos. Mueller Hinton Agar ahora se usa como medio de prueba para las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos. El agar Mueller Hinton se recomienda para la difusión de agentes antimicrobianos impregnados en un disco de papel a través de un gel de agar como se describe en el NCCLS (Comité Nacional de Estándares de Laboratorio Clínico), ahora estándar aprobado por el CLSI (Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio). El agar Mueller Hinton ha sido seleccionado por el CLSI por varias razones: es decir, demuestra una buena reproducibilidad de lote a lote para las pruebas de sensibilidad. ii. Es bajo en inhibidores de sulfonamida, trimetoprima y tetraciclina. iii. Apoya el crecimiento de la mayoría de los patógenos bacterianos no fastidiosos y iv. Se han registrado muchos datos y mucha experiencia en cuanto a su funcionamiento. Mueller Hinton Agar No. 2 se utiliza en las pruebas de susceptibilidad de bacterias aerobias y anaerobias facultativas de crecimiento rápido de muestras clínicas. Kirby-Bauer et al recomendaron este medio para realizar pruebas de susceptibilidad a los antibióticos usando un solo disco de alta concentración. El Comité de Normalización de las Pruebas de Susceptibilidad de la OMS ha aceptado el agar Mueller Hinton para determinar la susceptibilidad de los microorganismos debido a su reproducibilidad. El medio está diseñado para dar un bajo contenido de timina y timidina y también la concentración de iones de calcio y magnesio se ajusta según lo recomendado por CLSI. El medio no se recomienda para organismos exigentes. La timina y la timidina inhiben la actividad de la sulfonamida y la trimetoprima y el calcio y el magnesio interfieren con la actividad de los antibióticos aminoglucósidos.
COMPOSICIÓN
PRINCIPIO
La infusión de corazón de res y el hidrolizado ácido de caseína aportan compuestos nitrogenados, carbono, azufre y otros nutrientes esenciales. El almidón actúa como coloide protector frente a sustancias tóxicas presentes en el medio. La hidrólisis del almidón produce dextrosa, que sirve como fuente de energía. Estos ingredientes se seleccionan por su bajo contenido de timina y timidina según lo determinado por los valores MIC para Enterococcus faecalis con sulfametoxazol trimetoprima. Las concentraciones de iones de calcio y magnesio se ajustan para proporcionar las cantidades recomendadas por CLSI para dar los valores correctos de MIC con aminoglucósidos y Pseudomonas aeruginosa. El procedimiento de Kirby-Bauer se basa en la difusión en agar de sustancias antimicrobianas impregnadas en discos de papel. Este método emplea disco con una sola concentración de agente antimicrobiano y los diámetros de zona observados se correlacionan con valores de concentración inhibitoria mínima. Se frota una suspensión estandarizada del organismo sobre toda la superficie del medio. Luego se colocan discos de papel impregnados con cantidades específicas de agentes antimicrobianos sobre la superficie del medio, se incuban y se miden las zonas de inhibición alrededor de cada disco. La susceptibilidad se determina comparando con los estándares CLSI. Los diversos factores que influyen en las pruebas de susceptibilidad a la difusión por disco son la profundidad del agar, la potencia del disco, la concentración del inóculo, el pH del medio y la producción de betalactamasa por parte de los organismos de prueba.
INSTRUCCIONES DE USO
- Disolver 38,0 gramos en 1000 ml de agua purificada/destilada.
- Calentar a ebullición para disolver el medio por completo.
- Esterilice en autoclave a una presión de 15 psi (121 °C) durante 15 minutos.
- Enfriar a 45-50°C.
- Mezclar bien y verter en placas Petri estériles.
ESPECIFICACIONES DE CONTROL DE CALIDAD
Aspecto del polvo : Crema a amarillo homogéneo que fluye libremente.
Aspecto del medio preparado : Formas de gel transparentes a ligeramente opalescente de color ámbar claro en placas de Petri. pH (a 25°C) : 7,3±0,1
INTERPRETACIÓN
Características culturales observadas después de una incubación.
EMBALAJE
En envases de 100 g y frascos de 500 g.
ALMACENAMIENTO
Polvo deshidratado, de naturaleza higroscópica, almacenar en un lugar seco, en recipientes herméticamente cerrados entre 25-30°C y proteger de la luz solar directa. En condiciones óptimas, el medio tiene una vida útil de 4 años. Cuando se abre el envase por primera vez, anote la hora y la fecha en el espacio de la etiqueta provisto en el envase. Una vez que se haya extraído la cantidad deseada de medio, vuelva a colocar la tapa herméticamente para protegerla de la hidratación.
Deterioro del producto: no lo use si muestra evidencia de contaminación microbiana, decoloración, secado o cualquier otro signo de deterioro.
ELIMINACIÓN
Después de su uso, las placas preparadas, los recipientes de muestra/espécimen y otros materiales contaminados deben esterilizarse antes de desecharse.
REFERENCIAS
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