Agar thayer martin

Descripción

Agar Thayer Martin

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR THAYER MARTIN

El medio Thayer Martin preparado por Microgen permite la recuperación de Neisserias patógenas tales como N. gonorrhoeae y N. meningitidis.

COMPONENTES DEL AGAR THAYER MARTIN

• • Pluripeptona.
  • Fosfato dipotásico.
  • Fosfato monopotásico.
  • Cloruro de sodio.

• Agar GC.

• Glóbulos rojos de cordero.

• Suplemento vitamínico.

• Suplemento VCNT.

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR THAYER MARTIN

• Unidad, paquete por 10 placas.

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

• Mechero de Bunsen.
• Asas bacteriológicas.
• Elementos de protección.
• Incubadora a 35 – 37°C.
• Guantes. 
• Cepas ATCC.

METODOLOGÍA:

• Principio del método:

El Medio de Thayer Martin es preparado a partir de la Base de Agar GC, adición de Hemoglobina (Glóbulos Rojos de Cordero estériles desfibrinados), mezcla de antibióticos VCNT (Vancomicina, Colistina, Nistatina, Trimetoprima)

La Vancomicina, se utiliza para eliminar la mayoría de bacterias Gram positivas, aunque algunos organismos Gram positivos como Lactobacillus y Pediococcus son intrínsecamente resistentes; la colistina, se agrega para eliminar la mayoría de las bacterias Gram negativos, excepto los organismos de Neisseria, aunque algunos otros organismos Gram negativas, tales como Legionella también son resistentes; y la nistatina, que elimina la mayoría de los hongos. Contiene suplemento vitamínico.

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio utilizado para el aislamiento y desarrollo de especies de Neisseria patógenos. 

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

• Espécimen o muestra

Muestras clínicas, industriales o investigativas.

• Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
5. Incubar las placas entre 35 – 37°C en posición invertida, por 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio
6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR THAYER MARTIN

• Prueba Macroscópica: 

• Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color marrón 

• pH final: 7.2 ± 0.2 (25°C).

• Volumen: 19 mL ±.

• Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.

• Prueba de Efectividad: La prueba se debe realizar con un control negativo y uno positivo. La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR THAYER MARTIN

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

• APS One
• Cabina de flujo laminar
• Master Clave.
• Autoclave.
• Cepario.
• Incubadora.

BIBLIOGRAFÍA:

1. Thayer,J.D., and J.E. Martin, Jr. 1966. Impruven medium selective for cultivation of N. gonorrhoeae and Ni. Meningitides. Public Health Rep.81:559.3.
2. Martin, J.E., Jr. and J.S. Lewis. 1977. Anisomycin improve anti-mycotic activity in modified Thayer-Martin Medium. Public Health Rep. 35:534.
3. Insberg, H.D. (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook, vol. I. American Society for Microbiology, Washington, D.C.5.
4. Baron,E.J., L.R. Peterson, and S.M. Finegold. 1994. Bailey$ Scot´s diagnostic microbiology, 9th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, M.o.